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關(guān)于耐藥細(xì)胞株的一些相關(guān)信息分享
更新時(shí)間:2022-04-18 點(diǎn)擊次數(shù):1311次
  耐藥細(xì)胞株構(gòu)建的原理:
 
  細(xì)胞與低劑量的藥物長(zhǎng)期接觸,引起細(xì)胞本身藥物化學(xué)過(guò)程的改變,細(xì)胞膜上出現(xiàn)Pgp糖蛋白,使細(xì)胞逐漸對(duì)藥物耐受,隨著藥物濃度的遞增,其耐受程度逐漸加強(qiáng)。
 
  耐藥細(xì)胞株基本共性:
 
  1、所有的細(xì)胞表面均有由磷脂雙分子層與鑲嵌蛋白質(zhì)及糖被構(gòu)成的生物膜,即細(xì)胞膜。
 
  2、所有的細(xì)胞都含有兩種核酸:即DNA與RNA。
 
  3、作為遺傳信息復(fù)制與轉(zhuǎn)錄的載體。
 
  4、作為蛋白質(zhì)合成的機(jī)器—核糖體,毫無(wú)例外地存在于一切細(xì)胞內(nèi),核糖體,是蛋白質(zhì)合成的機(jī)器,在細(xì)胞遺傳信息流的傳遞中起重要作用。
 
  5、所有細(xì)胞的增殖都以一分為二的方式進(jìn)行分裂。
 
  6、能進(jìn)行自我增殖和遺傳
 
  7、新陳代謝
 
  8、細(xì)胞都具有運(yùn)動(dòng)性,包括細(xì)胞自身的運(yùn)動(dòng)和細(xì)胞內(nèi)部的物質(zhì)運(yùn)動(dòng)
 
  耐藥細(xì)胞株操作流程:
 
  1、載體構(gòu)建:將外源基因構(gòu)建到合適的載體上,如需病毒轉(zhuǎn)染,則包裝病毒。
 
  2、篩選濃度測(cè)定:以14天細(xì)胞全部死亡的抗生素濃度為篩選濃度。
 
  3、細(xì)胞接種:轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)前天接種細(xì)胞,各種細(xì)胞的平板密度依據(jù)各種細(xì)胞的生長(zhǎng)率和 細(xì)胞形狀而定。
 
  4、細(xì)胞轉(zhuǎn)染:用構(gòu)建好的載體(或包裝好的病毒)轉(zhuǎn)染目的細(xì)胞。
 
  5、抗生素篩選。
 
  6、鑒定篩選結(jié)果。
 
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